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兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒

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产品名称:兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒
产品规格:96T/48T
供应品牌:RD TSZ
保存条件:2-8℃
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
  兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒的详细资料:

兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒标本要求

1. 血清::温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2. 血浆:根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3. 尿液:无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒使用方法

测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

   12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

   6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

   3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

   1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作步骤
用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
   ↓   
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
   ↓   
于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,   37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
   ↓
加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
     ↓
终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
     ↓
结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

本公司提供各种种属各种系列ELISA检测试剂盒,主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
主要分为以下系列:
1.细胞因子检测试剂盒
2.内分泌检测试剂盒
3.肝纤维化检测试剂盒
4.心肌梗塞检测试剂盒
5.肿瘤标志物检测试剂盒
6.自身免疫检测试剂盒
7.优生优育检测试剂盒
8.传染病检测试剂盒等等。 
ELISA试剂盒本司提供实验代测服务,详情请登入我司查询

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主营:ELISA检测试剂盒;免疫组化试剂盒,胎牛血清;酶联免疫试剂盒,进口抗体,生物试剂 公司地址:上海市闵行区莘庄工业园区金都路3688号E幢101-106室 邮政编码:201100 
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